خسرو شکیبایی در ۷ فروردین ۱۳۲۳ درتهران به دنیا آمد. او در حرفه‌هایی چون خیاطی و کانال‌سازی و آسا نسور سازی کار می‌کرد. اما از ۱۹ سالگی برای اولین بار روی صحنه تئاتر رفت و بعد از مدتی به عباس جوانمرد معرفی و بعد از آن به صورت کاملاً حرفه‌ای بازیگر تئاتر شد. وی فارغ‌التحصیل بازیگری دانشکده هنرهای زیبای دانشگاه تهران بود و فعالیت هنری خود را از سال ۱۳۴۲ آغاز کرد، و با بازیگرانی همچون رضا بابک، امین تارخ، بهرام شاه محمدلو و هنرمندانی همچون محمد کوثر در تئاتر‌های دانشجویی آن زمان که اغلب در تالار مولوی روی صحنه می‌رفت، به ایفای نقش پرداخت.
سرانجام عباس جوانمرد، سرپرست گروه هنر ملی او را به این گروه دعوت کرد و در آنجا با محمود استادمحمد آشنا شد. حضور درخشان او روی صحنه سبب شد تا مسعود کیمیایی بعد از دیدن نمایش «شب بیست و یکم» به نویسندگی و کارگردانی محمود استاد محمد که در آن خسرو شکیبایی حضوری به یاد ماندنی داشت،به عنوان نخستین کارگردان او را برای بازی در فیلم «خط قرمز» دعوت کند و اولین حضور شکیبایی در سینما در اوایل دهه ۶۰ رقم خورد، اما آنچه او را به عنوان بازیگری تکرار نشدنی در سینمای ایران تثبیت کرد، بازی در نقش حمید هامون در فیلم «هامون» به کارگردانی داریوش مهرجویی بود.
اتفاقاً همان زمان هم بازی در نمایش «شاهزاده و گدا» به کارگردانی هادی مرزبان سبب شد که مهرجویی او را برای بازی در فیلم «هامون» که همچنان در سینمای ایران اثری یگانه است، دعوت به کار کند.
او پیش از سینما در آثار زیادی گویندگی کرده بود. و در اواخر سال های زندگی خود با دکلمه شعرهای سید علی صالحی و سهراب سپهری صدای زیبای خود را ماندگار کرد.
